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建議收藏:實驗室酶標(biāo)板的使用注意事項
更新時間:2024-01-26瀏覽:1123次

  實驗室酶標(biāo)板的使用注意事項


  根據(jù)不同的分類標(biāo)準(zhǔn),酶標(biāo)板有著不同的分類。

  一、根據(jù)孔數(shù),可分為96孔、48孔,其中96孔是現(xiàn)在常用的,因為酶標(biāo)板就是配合酶標(biāo)儀用,現(xiàn)在的酶標(biāo)儀做出來的最多的是96孔,所以客戶在購買時也是要96孔板,廠家也為了適應(yīng)市場基本上做出來的就是96孔的。

  二、根據(jù)其底部的不同,又分為平底的,U型底、V型底。平底的折射率低,適于在酶標(biāo)儀檢測;U型底的酶標(biāo)板折射率較高,方便加樣、吸樣、混勻等操作,可以不用放在酶標(biāo)儀上,直接通過目測觀察顏色變化情況,從而判定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng)。V底的酶標(biāo)板可以精確的吸取樣品。

黑色培養(yǎng)板.jpg

  三、根據(jù)酶標(biāo)板與蛋白和其它分子結(jié)合能力的不同,又分為高結(jié)合力,中結(jié)合力和氨基化的。

  1) 高結(jié)合力

  此種酶標(biāo)板,表面經(jīng)處理后,其蛋白結(jié)合能力大大增強,可達(dá)300~400ng IgG/cm2,主要結(jié)合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標(biāo)板可提高敏感性,并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反應(yīng)。抗原或抗體包被后,以非離子去污劑無法有效地封閉未結(jié)合蛋白的部位,需使用蛋白作為封閉劑。

  2) 中結(jié)合力

  此類酶標(biāo)板經(jīng)表面疏水鍵被動與蛋白結(jié)合,適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結(jié)合能力為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標(biāo)板所具有的僅與大分子結(jié)合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可降低潛在的非特異性交叉反應(yīng)。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。


96孔聚苯乙烯酶標(biāo)板.jpg

  3)氨基化

  這種酶標(biāo)板經(jīng)表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標(biāo)板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩沖液和pH值,其表面可通過離子鍵與帶負(fù)電荷的小分子結(jié)合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價結(jié)合的能力,可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于降低了疏水性,一部分蛋白分子無法結(jié)合;此外,其表面需有效地封閉。由于親水和共價的表面特性,使用的封閉液必須能夠與非反應(yīng)性氨基基團(tuán)和所選擇的交聯(lián)劑中任何功能基團(tuán)發(fā)生作用。

  四、另外根據(jù)顏色又分為透明、黑色、白色。

  透明的是常用的,用于最一般的酶聯(lián)免疫實驗。相對于透明的的板子,還有用于發(fā)光檢測用的不透明的板子,一般有黑色和白色兩種。黑色的酶標(biāo)板自身會有光吸收,所以它的信號相對于白色的板子要低很多,因此一般用于檢測較強的光,如熒光檢測。而白色的酶標(biāo)板就用于較弱的光檢測,常用于一般的化學(xué)發(fā)光。另外黑色的酶標(biāo)板還可以消弱非特異反應(yīng)帶來的問題。有些客戶會問,用一般的酶標(biāo)板可不可以進(jìn)行發(fā)光檢測,回答是不可以的,因為一般從化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中發(fā)射出的光是各向同性的,也就是說各個方向上同等發(fā)射出來的。如果用透明的板子,光不僅會從垂直方向發(fā)散,還從水平方向發(fā)散出來。很容易的就會通過各個孔之間的間隙和孔壁。這樣的話,光較強時相鄰孔之間的影響就會很大,因此不能用透明的酶標(biāo)板來進(jìn)行化學(xué)發(fā)光實驗。

  五、一般酶標(biāo)板大多是可以拆卸的,也就是單條可以拆下來,也有固定的板子。單條可拆的的板子其實可以省下許多錢,因為這樣的話,當(dāng)你想用新的酶標(biāo)板時,可以將酶標(biāo)板條拆下來,買些酶標(biāo)板條就可以了,只是要考慮要配相同的型號即可。另外,可拆的酶標(biāo)板可以用來做體外檢測,方便拆卸。

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